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siRNA/miRNA合成
诺百优势

1.质量保证:可进行科学的序列设计,针对某靶基因设计的3条siRNA可保证其中两条的Knockdown效率达到70%(在转染效率大于80%的情况下)

2.siRNA oligo均由HPLC纯化,100%除去尚未配对的单链,多种修饰选择:末端修饰(FAM,Biotin等),碱基修饰(2’-OMe)

原理
在RNAi效应阶段,siRNA双链结合一个核酶复合物从而形成所谓RNA诱导沉默复合物(RNA-induced silencing complex, RISC)。激活的RISC通过碱基配对定位到同源mRNA转录本上,并在距离siRNA3’端12个碱基的位置切割mRNA。
化学合成的siRNA具有操作简便、转染效率高、对细胞的或者组织的毒副作用小、可大规模制备等优点,特别适用于基因靶位点不确定情况下,进行siRNA有效片段的筛选。
服务流程

1.客户提供:siRNA oligo的序列信息或相应的靶基因信息(便于设计),以及技术要求(包括OD和nmols的精确数量、纯化类型、修饰要求等)

2.根据序列信息,进行化学合成;

3.HPLC纯化;经过分光光度计精确定量

4.冻干处理

5.我们提供:长度19-23碱基/链的siRNA,产品形式为退火的双链RNA的冻干粉,有以下选择

6.普通siRNA

7.化学修饰siRNA-利用2’-Fluoro或2’-OMe修饰以提高siRNA在血清和培养基中的稳定性;作用时间长于普通siRNA;荧光标记siRNA

8.siRNA对照,包括普通阴性对照(与目的靶细胞中所有基因无同源性的阴性对照)、荧光标记的阴性对照(方便在荧光显微镜下观察转染的效率,有利于优化转染条件)和siRNA阳性对照(作为一个实验系统检查,确保在实验方法中您的转染、RNA提取物和检测方法是可靠的;常用的siRNA阳性对照有LaminA/C,Beta-Actin,P53,GAPDH等)

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