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诺百优势
  • 质量保证:如无特殊要求我们将提供至少1 ml含107-108病毒颗粒的病毒液。
  • 去除了病毒的关键蛋白,对人体安全;属于复制缺陷型病毒,不会产生下一代病毒颗粒;已被改造为自身失活型,病毒转导并整合到细胞后不再具有产生具有包装能力的病毒。可根据需要选择组织特异性或细胞特异性启动子


原理

慢病毒系统是理想的可以在多种细胞类型(如原代细胞、干细胞和非分裂细胞)中实现可重复的稳定表达的基因表达工具。对于难转染的细胞而言,采用病毒递送外源基因的方式是非常有效的选择。慢病毒通过顺式作用元件将病毒运送到细胞核,并将要表达的基因序列整合到细胞的基因组中。采用慢病毒可以得到持续稳定的高表达。采用慢病毒系统进行高滴度的复制缺陷型慢病毒颗粒的生产,从而可以有效转导几乎所有分裂和非分裂细胞类型。

服务流程

1.客户提供:含有目标基因的质粒(提供测序图谱)或所要表达的目的基因的名称,序列;所需要的病毒滴度及总量,病毒是否需要纯化;若需要检测外源基因的表达,如需要请提供相应的抗体

2.含目的基因的慢病毒载体的构建和纯化提取

3.慢病毒表达载体、pGag/Pol、pRev、pVSV-G四质粒共转染293T细胞;

4.培养48-72h,收集培养上清;

5.病毒的纯化和浓缩;

6.滴度测定、目的基因检定

7.将制得的慢病毒液转导客户的靶细胞,筛选混合稳定细胞株,并检测靶基因的表达。

8.我们提供:提供重组后的慢病毒载体质粒,并附上对目的基因的PCR鉴定结果;提供已测定好滴度、可以直接进行后续分析的慢病毒储存液


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